檢測認證人脈交流通訊錄
- A549/FU耐藥細胞
細胞株名稱：A549/FU耐藥細胞人肺癌氟尿嘧啶耐藥株
種屬：人
組織來源：肺
微生物及支原體檢測：陰性
安全性：所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄
培養條件：A549/FU耐藥細胞
完全培養基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+1%P/S+1000ng/ml順鉑
血清我們推薦用:
GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。
培養條件：37.0Ccarbondioxide(CO2),5%
傳代方法：
收到細胞后，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，低速離心，打開細胞培養瓶，吸出培養液(注意不要吸出細胞)，換10ml新鮮培養液后繼續培養。
(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：
1.低速離心，棄去培養液，用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.按6-8ml/瓶補加完全培養基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養瓶中(補加完全培養基至8到10ml)。如果沒有特別說明，收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注：1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基，細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。
4、收到細胞后，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯系。
凍存方法：凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO
儲存：液氮儲存
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